Реферат
на тему: В«Прогноз, лікування і профілактика віспи натуральноїВ»
Введення
За даними С. С. Маренніковой, Е. Б. Гуревич, М. А. Юмашева (1959), вірус О. н. успішно виділяється від хворих з везикулярної рідини і суспензії кірок в культурі шкірно-м'язової тканини ембріона людини. Автори отримували тканину зі свіжих аборталишх зіскрібків від 8-11-тижневих плодів. Трипсінізірована одношарові культури вирощувалися в 0,5% розчині гідролізату лактальбуміну з додаванням 15% сироватки людини.
Для зараження використовували суспензії, що містять по 150 000 клітин в 1 мл, які розливали в пробірки і інкубували 3 дні при 1 В° 36 В°. Потім розчин заміняли свіжим і виробляли засів досліджуваного матеріалу в пробірки з наявністю суцільного клітинного пласта. Для індикації вірусу в тканині служила дегенерація клітин (Цитопатогенну дію вірусу) і гемадсорбції.
Для реакції гемадсорбції 0,2 мл 0,5% суспензії курячих еритроцитів (високочутливих до гемагглютінірующімі дії вірусу вакцини) додавали в кожну пробірку про культурою тканини через 24 години після зараження.
Після макроскопічного обстеження ділянку оболонки з ураженнями піддають мікроскопії (Готують пофарбовані препарати) і пасажу на свіжі ембріони. Для цієї мети оболонки подрібнюють у ступці і у вигляді суспензії на фізіологічному розчині 1: 3 центрифугують 10 хв. при 1500 об/м. У роботі використовують надосадову рідина. При відсутності бляшок на оболонці розкритих ембріонів роблять два В«СліпихВ» пасажу і тільки після цього реєструють негативний результат.
Виділення вірусу віспи натуральної в тканинних культурах вдається при використанні перещеплюваних епітеліальних клітин людського або мавпячого походження, які дають як розмноження вірусу, так і дегенерацію клітин - цитопатогенну дію (В. Д. Соловйов і Ю. Н. Мастюкова, 1958).
Ці ж автори показали, що найбільш швидким методом індикації вірусу є реакція гемадсорбції, що дозволяє не тільки виявляти його наявність в тканини, але і визначати специфічність шляхом додавання імунної сироватки, переважної гемадсорбції. Для цієї ж мети можуть служити трипсінізірована одношарові культури клітин, приготовані з органів людини і мавп.
При наявності змішаної популяції епітеліальних клітин і фнбробластов під дією вірусу віспи натуральної переважної дегенерації піддаються перші, а другі тривалий час залишаються інтактними. Це допомагає диференціювати цитопатогенну дію вірусу віспи натуральної від вірусу вакцини, який володіє вираженою цитопатогенну як для епітелію, так і для сполучної тканини.
Діагностичні дослідження методом тканинних культур проводяться за наступною схемою:
Зараження розвиваються курячих зародків і тканинних культур є найбільш чутливим, швидким і точним методом лабораторної діагностики віспи натуральної. Ідентифікація виділеного вірусу і його диференціація виробляються за ознаками, згаданим вище. Скрутніше всього диференціація вірусу віспи натуральної від вірусу вакцини. Тут додатково може бути застосоване усередині-шкірне (або нашкірному) зараження вірусом віспи натуральної кроликів. Воно дає позитивний результат лише при введенні концентрованого або слаборазведенного матеріалу і зазвичай не передається в пасажах від кролика до кролика. На відміну від цього, вірус вакцини викликає шкірні ураження у незначних дозах і вміст вакцинальних бульбашок легко передається в пасажах.
Зараження кроликів (Пауля метод). Раетертие кірки, лусочки, а також рідина, отриману з віспин, наносять на рогівку очей кроликів, попередньо провівши скарифікацію поверхні шляхом легких надрізів слизової оболонки. При наявності в досліджуваному матеріалі життєздатного оспенного вірусу через 36-48 годин виникають дрібні округлі вузлики висотою до 1 мм-оспенний кератит. Заражений очей витягують і занурюють в сулемовий спирт (суміш 30 мл етилового спирту, 4 г сулеми і 90 мл дистильованої води).
Позитивна реакція Пауля визначається тоді, коли через кілька хвилин після фіксації на місці прищепних надрізів виявляються вузлики, що різко відрізняються своїм білим кольором від навколишньої здорової прозорої тканини.
Метод Пауля менш чутливий і точний, ніж виділення вірусу в курячих ембріонах і тканинних культурах.
Серологічні методи діагностики
Поява і наростання титру Протівооспенная антитіл в крові у хворих і видужуючих визначаються серологічними реакціями з використанням специфічного антигену, приготовляемого найчастіше з вірусу вакцини, вирощуваного в розвиваються курячих ембріонах.
Діагностичне значення мають поява антитіл в крові у хворих, які не були вакциновані в попередні два роки, або чотириразовий і більше приріст антитіл, що виявляється при повторному взятті крові та одночасному дослідженні отриманих сироваток. Останнє дозволяє зробити більш обгрунтований висновок про природу диагностируемого захворювання. У хворих віспою натуральної антитіла з'являються в кількості, виявляють серологічними реакціями на 3-6-й день хвороби, досягають максимального титру на 2-3-му тижні і потім поступово знижуються.
Для серологічних досліджень зазвичай застосовують затримку гемаглютинації як найбільш просту по техніці виконання і разом з тим досить точну реакцію. Антиген готують із хоріо-аллантоісной оболонок 11-13-денних запліднених курячих яєць, попередньо заражених вірусом вакцини в розведенні 1: 100. Якщо використовується дермовакціна, то вона попередньо обробляється антибіотиками для звільнення від бактеріальної мікрофлори. Після інкубації заражених яєць (три дні при 1 В° 37 В°) оболонки витягують, ретельно розтирають в ступці і розводять фізіологічним розчином.
Використовують розтерті оболонки у вигляді 20% суспензії (по вазі), попередньо отцентріфугіроваіной при 1500 оборотах протягом 15 хв.
Антигеном є надосадової рідини, яку зберігають до 3 місяців і більш тривалий час в гіороженном стані.
Для гемаглютинації використовують еритроцити курей, останні заздалегідь відбирають по чутливості до вірусу вакцини. Мінімально допустима чутливість еритроцитів до вірусу вакцини становить розведення 1: 32 вихідного (20%) вірусного антигену. Для реакції використовують від двох до чотирьох гемагглютинирующих одиниць. Під гемагглютінірующей одиницею розуміють мінімальну кількість антигену в обсязі 0,25 мл, зухвала чітко видиму аглютинацію еритроцитів.
Підлягають дослідженню сироватки попередньо інактивуються 30 хв. при 1 В° 60 В° в розведенні 1:5 (Фізіологічним розчином). В реакції використовують дві контрольні сироватки: імунна кроляча, що містить антитіла до вірусу вакцини (позитивний контроль), та нормальна кроляча сироватка без антитіл (негативний контроль).
випробуваної сироватки розводять з коефіцієнтом 2 від 1: 5 до 1: 2560. Спочатку з'єднують антиген з сироватками і витримують протягом однієї години в термостаті (1 В° 35-37 В°) і 14 годин при 1 В° 4 В°. До цієї суміші додають 0,5% суспензії відмитих курячих еритроцитів і залишають на 1:00 при кімнатній температурі. Титр випробовуваних сироваток визначається як найвище розведення, що дає повну затримку аглютинації еритроцитів.
Крім затримки гемаглютинації, застосовують реакцію зв'язування комплементу в звичайній прописи; для витримування комплементу використовують антиген, що готується з хоріо-аллантоісной оболонок розвиваються курячих ембріонів, заражених вірусом вакцини.
Прогноз
Захворювання у щеплених протікає сприятливо. Вони зазвичай переносять легкі форми віспи натуральної, яка закінчується без утворення рубців і без ускладнень. Лише при повному зникненні у щеплених імунітету можуть розвинутися більш тяжкі форми, призводять до смерті. Легкий перебіг фази провісників зазвичай теж є сприятливим показником.
У грудних дітей та строків хвороба протікає важко, з великою летальні...
