СибірськийДержавний Медичний Університет
Кафедра Біологіїі Генетики
Звіт по літнійвиробничій практиці
Виконав:
Ш. В. Д.
(МБФ гр.4902)
р. Томськ 2010
Цілі експерименту:
Г? Визначитилінію самця (Cu, ct,vn (vu)(в™‚))виду DrosophilamelanogasterякогоВ«ВибереВ» самка wa(в™Ђ)для схрещування.
Г? Записатиі проаналізувати результати експерименту.
Об'єкт, на якому мипроводили дослідження:
мухидрозофіливидуDrosophila melanogaster. Вибір об'єкта обумовлений рядомпереваг:
Гј Високаплодючість (від 50 до 200 нащадків)
Гј Нетривалийцикл розвитку (дозрівання яєць 10-12 діб, тривалість життя 3-4 тижні)
Гј Маломучислом хромосом (гаплоїдний набір хромосом дорівнює 8 (2n = 8))
Гј Мухидрозофіли добре вивчені (відомо велика кількість генів, які визначаютьдобре помітні ознаки)
Гј Зручністьрозведення (харчування не вимагає особливих витрат)
Гј Чіткеподіл по підлозі (самці дрібніші за самок і ін)
Методика роботи:
Приготуванняживильного середовища (за рецептом).
Об'єкти: видDrosophila melanogasterлініїCu, ct,vn (vu)(в™‚) і wa (в™Ђ).
Особливості ліній:
v Cu(в™‚) - крила загнуті вгору
v Ct(в™‚) - крила з вирізками
v vn (vu)(в™‚) - крила без жилок
v wa(в™Ђ) - колір очей абрикосовий
У самки дрозофіли післяспаровування життєздатна сперма зберігається в статевих шляхах протягомдекількох діб. Тому у заплідненої самки в будь-який даний момент всемяприемник може перебувати деякий кількість сперми від попередньоїкопуляції. З цієї причини для схрещування необхідно брати незайманих(Віргінія) самок. З цією метою перед постановкою схрещування в тій лінії, денеобхідно отримати незайманих самок, всіх мух необхідно витрусити зпробірки. Так як самки і самці дрозофіли протягом 6-8 год після вилупленнянездатні до запліднення, все мухи, відібрані за цей період, незаймані.
У перші 2 ... 3 год післявильоту у мух не розправлені крила і тіло подовжене, світле. Унезаплідненої самки забарвлення покривів тіла світло-сіра. У нещодавновилупилися самців тіло світло-сіре, а на кінчику черевця видна чорна точка;лише через кілька годин кінчик черевця у самців стає повністю чорним.
Для схрещування 3 ... 5незайманих самок відповідної лінії поміщають в одну пробірку з таким жекількістю самців іншої лінії. Ці мухи складають батьківське покоління.При збільшенні кількості батьків з'являється небезпека перенаселення, ввнаслідок чого плодючість мух падає. Вона самка може відкласти до 200 яєць,але в перші 1,5-2 доби після вилуплення самки зазвичай не відкладають яєць абовідкладають їх дуже мало. Максимальна кількість яєць відкладають 3 ... 4-добовісамки. Кладка яєць найкраще відбувається на живильне середовище з добрепророслими дріжджами, тобто через 1 ... 2 доби після її приготування.Вживання середовища через 3 ... 4 доби після варіння не рекомендується.
Для відкладання яєць мухиповинні знаходитися в пробірці 3 ... 5 діб, після чого їх викидають, а звідкладених яєць розвивається наступне покоління мух. Підрахунок мух доцільнішевиробляти на 2 ... 3 добу після початку вильоту. У більш ранні терміни вилітаютьпереважно самки, а в більш пізні спостерігається загибель мух.
Хід роботи:
Взяли 20 пробірок, вкожну з яких посадили самку лінії wa(в™Ђ) і по 3 штуки самця кожній лінії Cu (в™‚),ct (в™‚), vn (vu)(в™‚). Після схрещування всі гібриди першого поколіннявиявилися дикого типу. Для отримання другого покоління ми видалили батьківськіособини (для більш високої точності результатів) і пересадили перше покоління F1в нове середовище. По закінченню 10 діб ми отримали і Проаналізувавши другийпокоління F2.
- Батьківськепокоління:
№ проб.
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
Лінії
Cu,ct, vn (vu)(в™‚) і wa (в™Ђ)
-ПоколінняF1:
№ проб.
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
Ознаки
ліній
Дикий тип
мухадрозофіла схрещування
- ПоколінняF2:
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
Ознаки
ліній
ct
ct
ct
ct
ct
vn
ct
ct
ct
vn
ct
ct
vn
vn
ct
ct
ct
ct
ct
Cu
Проаналізуємо таблицюВ«Покоління F2В»:
oCt - 75%
oVn - 20%
oCu - 5%
Висновок:
У 75% випадків самка wa(в™Ђ) В«вибираєВ» самця лінії Ct.Залучаючисамку, самці дрозофіл виробляють особливий ледь чутний звук.Науководоведено, що у мух дрозофіл близько 2 тисяч клітин мозку, які відповідають зашлюбну поведінку. При цьому більшість цих нейронів присутні і в мозкусамок.
Жіночі особиниспаровувалися з представниками трьох ліній. Ретельно проаналізувавшигенетичні параметри самок, щоб мати можливість порівняти рівніекспресії генів для випадків спаровування з самцями з різних ліній. Якз'ясувалося, вибір самця з "чужої" лінії не має практично ніякоговпливу на вищезазначені рівні експресії, але при цьому його генотип впливаєна визначення самкою партнера для спаровування і її плодючість.
Дані результати даютьможливість зробити висновок про те, що зазначені процеси регулюютьсягенетичними механізмами, закладеними порівняно давно, відразу післянастання статевої зрілості.
