Є 3 CAA ↑ TTG 5
Фрагменти ДНК, що маютьоднакові В«липкіВ» кінці, можуть з'єднуватися один з одним за допомогоюДНК-лігази, при цьому сайт рестрикції відновлюється. Фрагменти з В«липкимиВ»кінцями більш зручні для створення рекомбінантних ДНК, так як ДНК-лігазазабезпечує безперешкодне з'єднання фрагментів.
Ферментативна активністьрестриктаз вимірюється в одиницях активності. Це така кількістьферменту, який необхідно для повного гідролізу за 1:00 1 мкг ДНК фага О»при оптимальних умовах. оптимальні умови рестрикції для кожної рестріктазиє індивідуальними і залежать від рН, іонної сили, присутності певнихіонів, температури проведення реакції. Рестріктази є основнимиферментами, використовуваними в генетичній інженерії.
Питання № 2. Методиотримання химер
Успішна пересадкаембріонів може бути осуществленатолько між самками одного виду. Пересадкаембріонів, наприклад, вівцям і козам і навпаки супроводжується їхпріжівляемость, але не завершується народженням потомства. У всіх випадкахміжвидових вагітностей безпосередньою причиною абортів є порушенняфункції плаценти, мабуть, за рахунок імунологічної реакції материнськогоорганізму на чужорідні антигени плода. Ця несумісність може бутиподолана отриманням химерних ембріонів за допомогою мікрохірургії ..
Спочатку були отриманіхимерні тварини шляхом об'єднання бластомерів з ембріонів одного виду. Зцією метою отримували складні химерні ембріони овець об'єднанням 2 -, 4 -,8-клітинних ембріонів. Кожен складний об'єднаний ембріон складався з рівногочисла бластомерів ембріонів від 2 - 8 батьків. При цьому загальне число клітинколивалося від чотирьох-до восьмикратного збільшення нормального числа клітин.Ембріони вводили в агар і переносили в лігатірованние яйцепровід овець длярозвитку до стадії ранньої бластоцисти. Нормально розвиваються бластоцисти пересаджувалиреципієнтам і отримали живих ягнят, більшість з яких виявилися химернимиза даними аналізу крові і зовнішніми ознаками.
Отримані химерні вівцішляхом ін'єкції внутрішньої клітинної маси, виділеної іммунохірургіческім шляхомз ембріонів донорів в бластоцисти ембріонів реципієнтів. Зону пеллюціда убластоцист донорів видаляли инкубированием в 0,5%-ної пронази і пептірованіем.
Для відновлення їхфункції після обробки пронази ембріони культивували протягом 3 ч. Потімембріони без прозорої оболонки культивували протягом 1 год в антисироватки доклітинам печінки вівці, три рази відмивали і поміщали в розчин (1:4) сироваткикрові морської свинки на 1 ч. ціалізуватися клітини трофобласта видалялипіпетування, а ізольовану внутрішню клітинну масу вводили проколомін'єкційної піпетки через зону пеллюціда в трофобласт бластоцисти реципієнта.Після пересадки цих бластоцист отримані химерні ягнята як по рпізнакам групкрові, так і повнешнім ознаками.
Отримані химери і увеликої рогатої худоби (Г. Брем та ін, 1985) з'єднанням половинок 5 -6,5-денних ембріонів. П'ять із семи телят, отриманих після нехірургічноїпересадки агрегованих ембріонів, не мали ознак хімерізма. Один телябув химерою двох порід - бурою швіцкой і голштінофрізской. Однак масть буроюшвейцарської породи домінувала. Аналіз крові цього теляти показав присутністьгруп крові тільки від батьків голштінофрізской породи. Інший теля був химероюневизначеного походження.
Показана високаефективність отримання химер великої рогатої худоби об'єднанням морул беззони пеллюціда. Автори отримали химери великої рогатої худоби з В«подвійниймускулатурою В». У цих дослідженнях показано, що передача химерамбатьківського типу має випадковий характер, тобто потомство може розвиватисяз клітин, що відбуваються або від будь-якого ембріона, або від поєднання ембріонів.Половина всіх химер являє собою інтерес.
Найбільш показовоотримання химер від об'єднаних частин ембріонів різних видів, наприклад, вівці ікози.
Дослідження С.В. Фехілліта ін (1984) показали, що бластомери вівці і кози, укладені в агар іпоміщені на 4 - 5 добу в лігатірованний яйцепровід вівці, можуть формуватикомбіновані бластоцисти. Ці бластоцисти життєздатні і можуть розвиватисядо народження нормального потомства. У першому досліді в результаті об'єднання поодному бластомерів з 4-клітинних ембріонів вівці і кози отримано 17 бластоцист,пересадка яких завершилася здобуттям семи нащадків. Всі нащадки були схожів основному на ягнят, але у трьох з них руно мало поперечні валики і клаптіволосся, різко контрастують з щільно в'юнкою шерстю.
химери фермент нуклеаз
Питання № 3. Виписатиі дати пояснення термінам зустрівся при написанні контрольної роботи
Бактеріофаги(Фаги) -віруси, що інфікують бактерії.
Бібліотекагеному -набір клонованих фрагментів ДНК, що містить весь геном.
Пролом (пробіл) вДНК -відсутність одного або декількох нуклеотидів у ланцюгу ДНК.
гаплоїдії - ядро, клітина, організм,характеризуються одинарним набором хромосом, що становлять половину повногонабору, властивого даному виду організмів (символ n ).
Ген - одинична структура генетичноїінформації, ділянка хромосоми (молекули ДНК), що кодує структуру одного абодекількох поліпептидних ланцюгів, або молекул РНК, або певну регуляторнуфункцію.
Генна інженерія -сукупність прийомів, методів і технологій, у тому числі технологій отриманнярекомбінантних рибонуклеїнових і дезоксирибонуклеїнових кислот, по виділеннюгенів з організму, здійсненню маніпуляцій з ними і введенню їх в іншіорганізми.
диплоидов - ядро, клітина, організм,характеризуються подвійним набором гомологічних хромосом, представлених числом,характерним для даного виду (символ 2 n ).
ДНК - молекула дезоксирибонуклеїновоїкислоти, що складається з нуклеотидів (аденін, гуанін, цитозин, тимін),дезоксирибози і залишків фосфорної кислоти.
комплементарностіланцюг - одна з ланцюгів ДНК, використовувана вяк матриці для синтезу РНК і відповідна їй по взаємодії парнуклеотидів.
Лигирование - утворення фосфодіефірнимі зв'язкуміж двома підставами одного ланцюга ДНК, розділеним розривом. Цей термінвживають також у разі з'єднання тупих кінців і при утворенні зв'язку вРНК.
Липкий кінець - вільний одноланцюгових кінецьдвуцепочечной ДНК, комплементарної одноланцюгових кінця, що належить цій жеабо іншій молекулі ДНК.
Промотор - ділянка гена, відповідальний започаток його транскрипції.
РНК - молекула рибонуклеїнової кислоти,до складу якої входять нуклеотиди (аденін, гуанін, цитозин, урацил), рибоза ізалишки фосфорної кислоти.
Самка -реципієнт -самка в статеві шляхи якій вводяться яйцеклітини або ембріони для подальшоговиношування (синоніми: прийомна мати, ложнобеременная самка).
Хромосоми - генетичні структурніутворення ядра клітини, що складаються з ДНК і білків. У хромосомах укладенаспадкова інформація організму.
АТТ - Сайти - ділянки фагової і бактеріальноїхромосом, рекомбінація між якими призводить до інтеграції або виключеннюфага.
Сааті - ділянка консервативноїпослідовності, розташований приблизно на відстані 75 пар основ передстартовою точкою в транскрипційних одиницях еукаріот.
G -Білки - регуляторні білки, активуючіфермент, що синтезує вторинний посередник.
СПИСОКВИКОРИСТАНОЇ ЛІТЕРАТУРИ
1. В.С.Шевелуха, Е.А. Калашникова, Е.С. Веронін «ѲЛЬСЬКОГОСПОДАРСЬКА ...
