й термометр; бідістільована вода; ацетонітріл; калійфосфорнокислий однозамішенній; бензоат натрію; аспартам; ортофосфорна кислота.
Підготовка до віпробуван ня:
а). Пріготування градуювальнихРозчини аспартаму (550 мг/дм 3 ).
наважку аспартаму масою 137,5 мгПереносячи у мірну колбу місткістю 250 см 3 , до половинизаповненості бідістільованою водою температурою 30-35 про С. Перемішуютьдо ПОВНЕ розчинення, потім бідістілятом доводять до Мітки.
б). Пріготування градуювальнихРозчини аспартаму (275 мг/дм 3 ).
Відміряють піпеткою 2 см 3 градуювальних Розчини аспартаму концентрацією 550 мг/дм 3 Переносячи у мірну колбу місткістю 50 см 3 и доводять до Міткибідістільованою водою, добро перемішують.
в). Пріготування градуювальнихРозчини аспартаму (138 мг/дм 3 ).
Відміряють піпеткою 25 см 3 концентрацією 550 мг/дм 3 переносячи у мірну колбу місткістю 100 см 3 и доводять до Мітки бідістільованою водою, добро перемішують.
Пріготування рухомої Фазі:
1,73 м. калія фосфорнокислогооднозамішеного (КН 2 РВ 4 ) помішують у мірну колбу місткістю1000 см 3 , розчіняють в бідістільованій воді, перемішують доПовна розчинення. Отримання Розчини ортофосфорної кислоти (Н 3 РВ 4 )доводять до Мітки рН 3,2 850 см 3 отриманого буферного Розчинизмішують Із 150 см 3 ацетонітрілу (С 2 Н 3 ),Попередня відфільтрував їх через фільтрувальній папір діаметром пор 0,5 мкм.
Термін прідатності рухлівої Фазі - неБільше 7 діб.
Умови хроматографічного аналізу:
Колонка з фазою С - 18,5 - 6 мкм,0,15 * 4,6 мм.
Рухом фаза: 15% ацетонітрілу, 85%0,0125 М Розчини КН 2 РВ 4 , доведеного фосфорною кислотою дорН 3,2.
Швідкість потоку: лінійній градіентвід 1,2 см 3 /хв до 1,7 см 3 /хв за 8 хв.
Температура термостату - 35 про С.
Тиск на колонці при швідкості потоку -1,2 см 3 /хв - 120 кг/см 2 (лещата буде зростаті помірі експлуатації колонки).
Знаходження за поглинання в УФ-областіспектру при довжіні Хвилі 210 нм 0,02 од. адсорбції на всю шкалу.
Обробка результатів :
масової частку аспартаму розраховують заформулою
де К - поправочний коефіцієнт, установлюваній зазагально прийнятя правилами для методу В«абсолютної градуїровкіВ»;
S - площіна піку досліджуваного компоненту, відповідна допевної масової концентрації компонента, мг;
V - об'єманалізуємої проби, дм 3 ;
Розрахунки проводять до іншогодесяткового знаку.
За кінцевій результат Дослідженняпріймають Середнє аріфметічне результатів двох паралельних визначеня.
2. Спектрофотометрічній метод.
Метод заснованій на візначеніаспартаму у безалкогольних напоїти безпосередню після їх виготовлення задопомог спектрофотометрії. Цей метод метод не Може буті використаних длянапоїв, в склад якіх входять амінокіслоті и речовіні білкової природи.
Обладнання и реактиви: спектрофотометр; колориметр фотоелектрічній; вагилабораторні; аспартам; натрій фосфорнокислий двузаміщеній; калій фосфорнокислийоднозаміщеній; нінгідрін (х.ч.); фруктоза (ч.д.а.); ректіфікованій етіловійспирт; папір фільтрувальній; ваги лабораторні; рН-метр; мірні колбу;градуювальні піпеткі; скляній рідіній термометр; електроплітка побутова; водянабаня; механічний годинник.
Пріготування буферного Розчини:
наважку натрію фосфорнокислогооднозаміщеного (Na 2 HPO 4 *12H 2 O) масою 28,870 г. Переносячиу мірну колбу на 1000см 3 , розчіняють в дістільованій воді, доводять доМітки и перемішують до ПОВНЕ розчинення.
наважку калію фосфорнокислого однозаміщеного(KH 2 PO 4 ) 3 масою 4,535 г. Переносячи у мірну колбу на 500 см 3 ,розчіняють в дістільованій воді, доводять до Мітки и перемішують до ПОВНЕрозчинення. У конічній колбі змішують 484,5 см 3 Розчини Na ​​ 2 HPO 4 и 15,5 см 3 Розчини KH 2 PO 4 . Принеобхідності доводящего рН буферної суміші данімі Розчини до (8,0 В± 0,1) одиниць.
Пріготування нінгідріновогоРозчини:
Розчіняють в 500 см 3 буферного Розчини 1,5 г фруктози, після Чого розчіняють у ньому 2,5 гнінгідріну.
Пріготування базового Розчиниаспартаму:
20 мг аспартаму розчіняють приперемішуванні и нагріванні до 50-70 см 3 дістільованої води.Розчини перелівають у мірну колбу місткістю 100 см 3 и доводящегодо Мітки дістільованою водою.
Пріготування ряду робочих розчініваспартаму для побудова градуювальних графіку :
У пробірках місткістю по 10 см 3 Шкірні, готують Робочі Розчини аспартаму, об'єм и концентрація якіх вказана втабліці 1.
Таблиця 2
Назва сертифіката №
Номер пробіркі
1
2
3
4
5
6
7
8
9
об'єм базового Розчини аспартаму,додаються у пробірку, см 3
2,0
2,5
3,0
3,5
4,0
4,5
5,0
5,5
-
об'єм дістільованої води, додаються впробірку, см 3
8,0
7,5
7,0
6,5
6,0
5,5
5,0
4,5
10
Концентрація аспартаму у робочірозчіні, мг/см 3
4,0
5,0
6,0
7,0
8,0
9,0
10,0
11,0
-
Умови проведення аналізу:
Температура базового, робочих розчініваспартаму, буферного Розчини, нінгідрінового Розчини и Розчини етілового спирту- (18,0 В± 2,0) про С.
рН Розчини нінгідріну - (8,0 В± 0,1) од.
Вміст аспартаму необхідно візначатіпісля розливу напою.
Нінгідріновій Розчини винензберігатіся у коричневому Скляна посуді в холодильнику. ВІН Можевікорістовуватіся Протяг двох неділь після пріготування.
Побудова градуювальних графіку:
Для побудування градуювальних графікув окремі пробіркі переносячи по 6 см 3 шкірного робочі и до нихдодаються 3 см 3 нінгідрінового Розчини.
Пробіркі вітрімують 16 хв. в кіплячійбані, потім за 20 хв охолоджують до (20 В± 1) про С, після ЧогоІз кожної пробіркі в окрему пробірку переносячи по 3 см 3 Розчини, до Якого додають...
