льної чутливості детектора на рівні 10-8 одиниць показника заломлення точність термостатування повинна бути не більше В± 0.01 В° С. При хорошому термостатування детектор мало чутливий до змін витрати рухомої фази. Він простий конструктивно, зручний в роботі, недеструктівен і дає високу відтворюваність показань. Недоліком детектора є його нечутливість до речовин, що мають показник заломлення, однаковий з розчинником.
Робота більшості сучасних рефрактометричних детекторів заснована на трьох різних принципах вимірювання сигналу: відхиленні, відображенні і інтерференції. Нижче на малюнку представлена ​​оптична схема рефрактометра перший типу.
Світло від лампи (1), проходить через конденсорних лінз (2), растрову грати (3) і лінзу (4), що служить для утворення паралельних пучків світла, які потрапляють у кварцову кювету. Кювета являє собою дві суміжні призми a, b, розділені светопроницаемой перегородкою, що утворюють плоскопаралельну пластину. Призма a заповнюється рухомою фазою, тоді як через призму b протікає елюатів з хроматографічної колонки (стрілки вказують на напрямок потоку). За наявності різниці показників заломлення в призмах, світло, що падає на вхідну грань кювети заломлюється на межі розділу призм і відхиляється на певний кут. Відхилений світло розщеплюється призмою і падає на пару фотодіодів (8). Різницю сигналів обох фотодіодів пропорційна відхиленню променя світла, а, отже, і різниці коефіцієнтів заломлення. Установка нуля детектора здійснюється обертанням плоскопараллельной пластини (7), що зміщає промінь світла.
Інший метод виміру заснований на законі відбиття світла (закон Френеля), згідно з яким інтенсивність відбитого світла, що падає на поверхню межі розділу рідини і скла, пропорційна куту падіння і різниці показників заломлення двох середовищ. Перевагою детекторів, що працюють на цьому принципі, є менший обсяг осередків (<3 мкл), у зв'язку з чим вони можуть працювати при невеликих витратах елюента і з високоефективними колонками. Однак чутливість таких детекторів в 50-100 разів нижче чутливості інших типів рефрактометричних детекторів, що, до речі, робить їх більш придатними для градієнтного елюювання. Так як детектування відбувається на межі розділу рідини і скла, для одержання стабільної роботи детектора необхідно стежити за чистотою скла.
Детектор френелевского типу містить у собі джерело світла, конденсор, диференціальну осередок скляні стержні, лінзу і фотоприймач. До його складу входять також теплообмінники і діафрагма для регулювання сили світлового потоку. Джерело Скляні детекторів.
1. практиці. Широко застосування. Експериментально встановлено,
1. З цією метою застосовують
2.
Примітка:
В· Розрахунок
В· Розчин
Висновок.
В·
Висновок.
В·
розчинів.
кон, додали 2 краплі хромату калію, тітруем 0,1 М розчином нітрату срібла до фарбування осаду в оранжево-бурий колір.
Т = 0,01029
а = 0,5
VТ = 0,49
x = (0,01029 x 0,49 х 100%)/0,5 = 1,0%
Допустиме відхилення (пр. № 305) В± 5%
Кількісне визначення магнію сульфату:
Комлексонометрія.
Методика кількісного визначення:
0,5 мл випробуваного розчину помістили в пеніциліновий флакон, додали 1-2 краплі індикатора кислотний хром чорний. Тітруем розчину трилону Б до переходу забарвлення з фіолетового в блакитний. Додаємо аміачний буфер для підтримки pH середовища.
Т = 0,01232
а = 0,5
VТ = 0,4
x = (0,01232 x 1,0 х 100%)/0,5 = 2,46%
Допустиме відхилення (пр. № 305) В± 5%
Відносне відхилення: 2,46 - 2,5/2,5 * 100% = 1,44%
Кількісне визначення глюкози доцільно проводити Рефрактометричний.
С = (1, 3651 - (1.333 + 1 * 0.00131 +2,46 * 0,00095)/0,00142 = 19,8%
Допустиме відхилення: + - 5%
Відносне відхилення:
19,8 - 20/20 * 100% = 1%
Висновок.
Відповідно до наказу № 305 від 16.10.97 відхилення укладається в норму допустимих відхилень. Лікарська форма приготовлена ​​задовільно.
В· Кислоти аскорбінової 0,1
Глюкози 0,5
Справжність:
Кислота аскорбінова:
0,05 - 1 г суміші розчиняють в 1-2 мл води, додають 1-2 краплі аміачного розчину срібла нітрату. Випадає темний осад.
Глюкоза:
0,05-1 г суміші розчиняють в 1-2 мл води, додають по 2-3 краплі пергідролю і розчину аміаку і кип'ятять 2-3 хвилини. Після охолодження додають 1 мл реактиву Фелінга і знову нагрівають. Реактив Фелінга складається з 2 розчинів. Розчин № 1 являє собою водний розчин міді сульфату, підкислений сірчаною кислотою. Розчин № 2 - це лужний розчин калію-натрію тартрату. Реактивом служить суміш рівних об'ємів обох розчинів. Утворюється цегляно-червоний осад.
Схеми реакцій див. стор.15.
Кількісне визначення:
Кислота аскорбінова 0,05 г порошку розчиняють в 1-2 мл води і титрують 0,1 н розчином натрію гідроксиду до рожевого забарвлення (Індикатор - фенолфталеїн).
Глюкоза Розчиняють 0,3 г порошку в 1-1.5 мл води, об'єм доводять водою до 2 мл і визначають показники заломлення розчину і води.
Якщо на титрування кислоти аскорбінової в наважці масою 0,05 г (а1) (М = 176,13 г/моль) витрачено 4,25 мл 0,1 моль/л розчину натрію гідроксиду (К = 1,01), а показник заломлення розчину, отриманого розчиненням в 2,0 мл води навішування масою 0,3 г (а2) - 1,3544
Фактор показника заломлення розчину кислоти аскорбінової (F1) - 0,00160; безводної глюкози (F2) - 0,00142. Показник заломлення води - 1,333. За результатами титрування необхідно розрахувати вміст кислоти аскорбінової (M1) в перерахунку на масу порошку по прописи (Р).
Фактор еквівалентності кислоти аскорбінової в методі нейтралізації дорівнює 1.
Титр натрію гідроксиду по кислоті аскорбінової:
Потім розраховують концентрацію кислоти аскорбінової (С1) в приготованому для рефрактометрії розчині за формулою:
Вміст глюкози (m2), в перерахунку на масу порошку по прописи одно:
Висновок.
Відповідно до наказу № 305 від 16.10.97 відхилення укладається в норму допустимих відхилень. Лікарська форма приготовлена ​​задовільно.
Висновок:
Висновок із усього написаного вище випливає такий:
Рефрактометричний метод аналізу, простий, швидкий і зручний. Але найбільше значення він має все ж для харчової промисловості та медицини (наприклад, для визначення білка).
Список літератури
1. Рефрактометрія в аналізі лікарських засобів аптечного виготовлення. Контроль якості лікарських засобів, виготовлених в аптеках/ГОУ ВПО Нижегородська державна медична академія Російського федерального агентства та соціального розвитку. Кафедра фармацевтичної хімії і фармакогнозії - Нижній Новгород, 2008р., 19 с.
2. Компанія Євролаб [Сайт компанії]; .eurolab.ru/refraktometriya (Дата звернення 20.12.2023)
3. Компанія Євролаб [Сайт компанії]; .eurolab.ru/refraktometry (Дата звернення 20.12.2023)
4. Березина Е.С., Кисельова О.О., Філіппова Ю.В. /Вісник Пермської державної фармацевтичної академії № 2 - Перм, 2007 р., с.123-125
5. Компанія Аквілон хроматографія [Сайт компанії]; .prochrom.ru/ru/? idp = 127 (Дата звернення 20.12.2023)
